体外细胞毒性试验是一种在离体状态下模拟生物体生长环境，检测生物材料接触机体组织后所发生的细胞溶解、抑制细胞生长和其他毒性作用的体外试验。

　　GB/T16886.5-2017标准为医疗器械的体外细胞毒性试验提供了科学、规范的方法论指导。通过遵循该标准进行试验，可以全面评估医疗器械在模拟生物体生长环境下的细胞毒性作用，为医疗器械的临床应用提供科学依据。

　　体外细胞毒性试验GB/T16886.5-2017要求

　　GB/T16886.5-2017《医疗器械生物学评价第5部分：体外细胞毒性试验》

　　本部分描述了评定医疗器械体外细胞毒性的试验方法。

　　本部分规定了与器械和/或器械浸提液直接接触或通过扩散的方式与培养细胞接触的孵育方法。

　　本部分适用于用适宜的生物学参数体外测定哺乳动物细胞的生物学反应。

　　试验要求：

　　1)细胞选择和培养条件：应选用适当的哺乳动物细胞系进行试验，并确保细胞在培养过程中处于良好的生长状态。

　　2)浸提介质和培养基的选择：应根据医疗器械的材质和预期用途选择合适的浸提介质和培养基。标准推荐首选含血清培养基作为浸提介质，并明确了MTT试验中使用的培养基种类和条件。

　　3)试验操作：试验操作应准确可靠，结果应可重复性。同时，应详细记录试验过程中的各项数据，包括细胞数量、活性、形态等，以便进行后续的数据分析和结果解读。

　　体外细胞毒性试验方法

　　GB/T16886.5-2017标准中的体外细胞毒性试验主要分为定性试验和定量试验两种类型：

　　（1）定量试验：

　　MTT/XTT试验：利用MTT或XTT试剂检测细胞线粒体活性，从而评估细胞存活率。MTT试验通过测定活细胞还原MTT形成的甲瓒结晶的量来反映细胞活力；XTT试验则使用类似的原理，但试剂不同。

　　中性红摄取试验（NRU试验）：通过检测细胞对中性红的摄取能力来评估细胞存活和增殖情况。

　　集落形成试验（CFA试验）：观察细胞在培养过程中形成集落的能力，以评估细胞的增殖潜力和对材料的反应。

　　（2）定性试验：

　　浸提液试验：将医疗器械或其部件在特定的浸提介质中浸泡，收集浸提液后，将其与哺乳动物细胞共同培养，观察细胞形态和生长情况。

　　琼脂扩散试验：通过将试验样品置于被琼脂层覆盖的哺乳动物细胞层上，观察细胞毒性是否通过琼脂层扩散至细胞层。

　　直接接触试验：将医疗器械或其部件直接与哺乳动物细胞接触，观察细胞对材料的反应。