祛痘类化妆品体外功效评价方法有哪些


化妆品的祛痘功效是指有助于减少或减缓粉刺的发生,有助于粉刺发生后皮肤的恢复。国家药监局《化妆品功效宣称评价规范》中规定宣称具有祛痘功效的化妆品应当通过人体功效评价试验方式进行功效宣称评价。化妆品祛痘功效评价方法主要包括体外实验、在体实验和感官评价实验。
祛痘类化妆品体外功效评价方法介绍
(1)控油功效
痤疮患者普遍出油较多,皮脂腺分泌旺盛,人皮脂腺细胞大量分泌脂质是发生痤疮的前提条件。油红O又名苏丹红5B,为脂溶性染料,在脂肪内能高度溶解,可特异性地使组织内甘油三酯等中性脂肪着色,用于显示组织器官的脂肪变性和类脂质的异常沉着。利用油红O的这一特性,可对培养后的人体皮脂腺细胞进行染色观察,分析其脂质含量和形态。
(2)抑菌功效
痤疮丙酸杆菌为革兰氏染色阳性的厌氧杆菌,广泛存在于人体皮肤表面的脂质中,主要存在于正常皮肤的毛囊和汗腺中,是皮肤中的正常寄生菌群。大量研究表明痤疮丙酸杆菌与皮脂分泌、过度角化、炎症和组织损伤有着密切的关系。
痤疮丙酸杆菌可促进皮脂腺细胞促肾上腺皮质素释放激素上调,从而促进皮脂分泌。同时,痤疮丙酸杆菌可产生多种酶(蛋白酶、脂肪酶、透明质酸酶、神经酰胺糖苷内切酶等),通过损伤表皮细胞的完整性而使毛囊漏斗部过度角化,引起皮脂管的梗阻,形成痤疮。
另外,痤疮丙酸杆菌可将皮脂中的甘油三酯转化为游离脂肪酸,进一步加重痤疮的进程。所以,测定受试物对痤疮丙酸杆菌的抑制效果,能反映出受试物的祛痘功效。常见的测试抑菌效果的方法为:微量肉汤稀释法测定最低抑菌浓度、悬液定量法测定抑菌率、抑菌环法测定抑菌效果。
(3)抗炎功效
痤疮是毛囊皮脂腺单位的一种慢性炎症性皮肤病。在众多因素的影响下,痤疮丙酸杆菌等细菌利用皮脂中的甘油三酯大量繁殖,产生游离脂肪酸,而皮脂又在紫外线﹑污染物﹑金属离子等的作用下氧化分解成丙二醛﹑角鲨烯过氧化物等物质,从而刺激细胞产生炎症因子,导致炎症的发生。
所以测试细胞的抗炎活性可一定程度上反映物质的抗痤疮能力。白介素(IL-1)是最早发现的与炎症相关的细胞因子之一,主要包含了IL-1α、IL-1β和IL-1受体拮抗剂(IL-1Ra),IL-1α可通过调节毛囊皮脂腺漏斗部角质形成细胞的分化,引起导管的过度角化,从而引发痤疮。单核巨噬细胞THP-1是机体重要的免疫细胞,THP-1细胞在发生免疫反应时,会特异性地产生IL-1β,所以通常会将其作为炎症筛选的指标。所以,可以通过ELISA法测定细胞炎症因子IL-1α、IL-1β含量。
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